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脊髓灰質炎病毒通用型PCR檢測試劑盒規(guī)格

產品簡介

脊髓灰質炎病毒通用型PCR檢測試劑盒規(guī)格
上海聯(lián)祖生物相關產品:
17-KS檢測試劑盒 高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好

更新時間:2021-03-13
訪問次數(shù):711
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組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

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 產品名稱

 脊髓灰質炎病毒通用型PCR檢測試劑盒規(guī)格

 英文名稱

 Poliovirus(PV)RTPCR

 貨號

 LZP7156

實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
Di-n-octylamine酸性鉻藍K AR氯亞鉑酸 AR

Diphenylamine偶氮熒光桃紅 Biological stain醋酸鈀 AR,Pd 46.0 - 48.0 %

Barium diphenylamine sulfonate偶氮熒光桃紅 Dye content 90 %氧化鈀 Pd ≥85%

N,N'-Diphenylbenzidine鹽酸氨基脲 99%無氧化鉑 鉑含量≥85.4%

1,7-Diamiheptane鹽酸氨基脲 分析標準品,99.95%硝酸鉑溶液 Pt, 15%

Malonamide1-氨基-2-萘酚-4-磺酸 97%氯化鈀  Pd 59-60%

N-Methylacetamide茜素絡合指示劑 Indicator硝酸鈀(II) 合物 Pd ≥39.0%

2'-Nitroacetanilide茜素 97%鈀粉 99.9% metals basis,粒徑0.5μm

4-Nitroacetanilide苯胺藍,酸溶 Biological stain硫酸鈀 Pd 51.2%-53.9%

3-Ami-1-propal茜素綠 AR硫酸鈀,二  Pd ≥44%

Isopropalamine苯胺藍(溶) BS IND氯亞鈀酸 Pd ≥32.6%

Salicylanilide偶氮胭脂紅G Biological stain氧化鉑化物 AR,99.95%

Succinimide茜素綠 Dye content 95%鈀碳酸鈣 鈀含量, 5.0%

Sulfanilamide燦爛綠 高純級,95%超細鉑粉 99.9%,平均粒度:0.1-0.5μm

Triisoamylamine鉍試劑Ⅰ 97%四氯化鉑 鉑含量,58%

Trimethylamine hydrochloride鉍試劑II CP海綿鉑 99.95%

咖啡酸(進口標準品)Rab11FIP1 (D9D8P) Rabbit mAbRabbit Anti-Mink IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標記的兔抗貂IgG

硫酸新霉素PathScan® Total Androgen Receptor Sandwich ELISA KitRabbit Anti-Mink IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的兔抗貂IgG

硫酸新霉素(標準品)β2-microglobulin (D8P1H) Rabbit mAbRabbit Anti-Mink IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的兔抗貂IgG

鹽酸苯海拉明BAF Complex Antibody Sampler KitRabbit Anti-Mink IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的兔抗貂IgG

鹽酸苯海拉明(標準品)c-Myc (D84C12) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)Rabbit Anti-Mink IgG  兔抗貂IgG

聚肌苷酸MRP4/ABCC4 (D1Z3W) Rabbit mAbRabbit anti-MG IgG/RBITC  羅丹明標記的兔抗長爪沙鼠IgG

米屈肼SMYD3 (D2Q4V) Rabbit mAbRabbit anti-MG IgG/PE-Cy7  PE-Cy7標記的兔抗長爪沙鼠IgG

米屈肼(標準品)Sin1 (D7G1A) Rabbit mAbRabbit anti-MG IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的兔抗長爪沙鼠IgG

卡拉膠Prostatic Acid Phosphatase (D3Y5P) Rabbit mAbRabbit anti-MG IgG/PE-CY5  PE-CY5標記的兔抗長爪沙鼠IgG

普侖司特uPAR (D4Q5S) Rabbit mAbRabbit anti-MG IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標記的兔抗長爪沙鼠IgG
脊髓灰質炎病毒通用型PCR檢測試劑盒規(guī)格人沙眼衣原體(CT)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

人沙眼衣原體抗體(CT)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8℃,避光10克

人山梨醇脫酶(SDH)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:10克

人傷寒抗原(St-Ag)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8℃1克

人上皮膜抗原(EMA)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:10克

人上皮特異性抗原(ESA)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT,避光25克

人上皮細胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1克

人上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:500克

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